Има много начини за измерване на бактериалния растеж и един начин е по -сложен от другия. Въпреки че понякога последователността на измерването трябва да се пренебрегва, най -лесният начин е достатъчно да се измери точно растежа на бактериите, така че той често да се използва. Най -често използваните методи са наблюдение и преброяване на бактерии, измерване на суха или влажна маса и измерване на нивата на мътност/мътност. Лабораторията на вашето училище трябва да разполага с инструментите и оборудването, необходими за извършването на поне един от тези експерименти.
Стъпка
Метод 1 от 3: Мониторинг на бактерии на живо
Стъпка 1. Подгответе съставките
Има много специални инструменти, които трябва да бъдат подготвени и може да не са налични в биологична лаборатория. Подгответе цялото оборудване и контейнери преди провеждане на експеримента, така че да няма проблеми по време на процеса. Ще трябва да знаете всяка съставка, която се използва веднага, и основните условия на този експеримент.
- Подгответе камерата за броене. Той има вградена камера, стъкло за микроскоп и микроскоп, така че е лесен за настройка и използване. Можете да го закупите от лаборатория или магазин за училищни консумативи. Този инструмент трябва да има инструкции, които да ви водят през целия процес.
- Пригответе чаша за наливане или разпределена чаша. И двата контейнера ви позволяват да наблюдавате бактериите вътре.
- Културата е термин, използван за описване на растежа на организмите в експеримент.
- Бульонът е течна среда, в която културата расте.
Стъпка 2. Използвайте метода за наливане или разстилане
Можете също така да поставите бактериите директно върху съда за разглеждане с помощта на микроскоп. Изсипете културата върху чинийка и я поставете под микроскопа. Следете броя на наличните бактериални клетки.
Стъпка 3. Уверете се, че концентрационната доза е правилна
Ако има твърде много, бактериите ще се натрупат една върху друга и може да се изчислите грешно. Разредете културата, като смесите в повече бульон. Ако има твърде малко, резултатите от изчислението няма да бъдат точни. Прецедете бульона с помощта на филтрационна система.
Стъпка 4. Пребройте бактериите
Последната стъпка е да преброите бактериите една по една. Погледнете през лупата в камерата за броене и запишете броя на бактериите, които виждате. Сравнете резултатите с резултатите от други тестове.
Метод 2 от 3: Измерване на суха и мокра маса
Стъпка 1. Уверете се, че имате подходящото оборудване
Този метод използва скъпо оборудване и много време. Ако вашата лаборатория няма необходимото оборудване, добра идея е да използвате друг метод. Въпреки това, ако вашата лаборатория е достатъчно добре оборудвана, препоръчваме този метод, тъй като той осигурява по -последователни резултати. При този метод ще ви трябва:
- Хидравлична гравитационна конвекционна фурна
- Контейнер за претегляне от алуминий
- Комплект колби (лабораторни бутилки)
- Центробежна машина (центрофуга) или лабораторна филтрационна система
Стъпка 2. Уверете се, че културата е в колбата
Добавете културата към тиквата. На този етап културата трябва да бъде бульон, въпреки че по -късно тя отново ще бъде отделена.
Стъпка 3. Изсушете алуминиевия контейнер за претегляне в лабораторната фурна
Вместо това можете да използвате филтърна мембрана от целулозен ацетат с диаметър 47 mm и размер на порите 0,45 µm. Какъвто и контейнер за претегляне да използвате, претеглете го, тъй като той ще трябва да бъде приспаднат по -късно при претегляне на бактериални клетки.
Стъпка 4. Разбъркайте културата в колбата, докато се смеси равномерно
Клетката ще потъне естествено поради гравитацията и ще трябва да се разбърква, за да се разнесе равномерно в колбата. По този начин можете да имате повече проби.
Стъпка 5. Използвайте центрофуга, за да отделите бактериалните клетки от бульона
Този инструмент върти колбата и бързо се уравновесява, така че тя източва бульона и оставя културата в колбата.
Стъпка 6. Изстържете пастата върху тиквата и я поставете в контейнер за претегляне
Изхвърлете бульона, защото вече нямате нужда от него. Въпреки това, все още не се отървете от тиквата, защото тя все още ще се използва.
Стъпка 7. Изплакнете центробежната машина и излейте водата за изплакване в контейнера
Пуснете водата за изплакване в колбата върху бактериалните клетки, за да получите мокрото тегло.
Стъпка 8. Намерете сухото тегло
За да измерите сухото тегло, поставете контейнера във фурната и изсушете при 100ºC за 6-24 часа съгласно инструкциите от използваната фурна и/или претеглящ съд. Уверете се, че температурата не е твърде висока, за да не изгорят бактериите. Претеглете бактериите, когато приключите, и не забравяйте да намалите резултата с теглото на контейнера за претегляне.
Метод 3 от 3: Измерване на мътността
Стъпка 1. Подгответе необходимото оборудване
Ще ви трябва източник на светлина и спектрофотометър. И двете могат да бъдат закупени в магазини за лабораторни консумативи. Спектрофотометърът трябва да има инструкции, които ще ви насочат да използвате инструмента според модела, който имате. Цената на спектрофотометъра е доста достъпна и лесна за използване, така че може да се превърне в един от най -често използваните методи за измерване на бактериалния растеж.
Стъпка 2. Запалете пробата
Според термина Layman, мътността е нивото на мътност на пробата. Трябва да получите номера за измерване на мътността, който се измерва в NTU (Нефелометрична единица за мътност). Този инструмент трябва да бъде калибриран, преди да може да измери точно пробата.
Стъпка 3. Запишете резултатите
Мътността се влияе от броя на бактериите в пробата. Спектрофотометърът също ще ви покаже процента на предаване (%T). Тази цифра ще се увеличи, ако мътността се понижи. Сравнете резултатите с резултатите от други тестове, за да измерите растежа на бактериите.
Внимание
- Тъй като имате работа с бактериална колония, вземете предпазни мерки, като носите предпазни средства като предпазни очила и ръкавици. Също така е добра идея да носите маска, особено ако не знаете вида бактерии, които се изследват.
- Вземете предпазни мерки, преди да боравите с всякакъв вид бактерии, дори с безобидния. Уверете се, че всички отворени рани по тялото ви са напълно покрити, преди да започнете.
